雷帕霉素防治腹膜透析大鼠腹膜纤维化及其机理研究

【摘要】研究背景：腹膜纤维化迄今仍然是一个世界性的难题,是导致尿毒症患者被迫中断长期腹膜透析的最主要因素。在非生理性腹膜透析液的长期刺激下,就会导致腹膜纤维化的发生,其主要机理是腹膜间皮细胞从上皮细胞表型向肌纤维母细胞的转分化,即上皮间质转化(EMT)过程的发生,由此启动细胞增殖和胶原等基质的积聚等,主要信号转导涉及到Smad通路、PI3-K/Akt/mTOR途径等。雷帕霉素(rapamycin),通过与FK结合蛋白(FK-bindingprotein,FKBP)结合,阻断哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin,mTOR)的表达,进而抑制细胞生长与增殖。在肾、肝、心等多个脏器领域的研究中雷帕霉素在抗增殖和抗纤维化方面已经显示了重要作用。目前雷帕霉素在抗腹膜纤维化领域的作用也受到越来越多的重视。目的：明确雷帕霉素对于腹膜透析模型大鼠腹膜纤维化的防治效果,阐明雷帕霉素对于腹膜透析模型大鼠腹膜纤维化的可能信号转导分子机制。实验方法：动物层面,取45只正常SD大鼠,随机分为5组：正常组,生理盐水组,高糖组,低浓度雷帕治疗组,高浓度雷帕治疗组,6周后处死,评估腹膜功能，取腹壁组织,行HE及α-SMA、TGF-β的免疫组化染色,分析各组腹壁纤维化情况；细胞层面,取正常SD大鼠腹膜,原代培养腹膜间皮细胞,取第3-4代细胞,予以不同浓度高糖(30,60,120mM)干预,及不同浓度雷帕霉素(’10,100nM)干预,作细胞划痕实验,同时于处理48h后提取蛋白,分析高糖对α-SMA及E-cadherin的变化,以及雷帕霉素对腹膜细胞EMT的影响。结果：动物层面：高糖组大鼠的腹膜功能相较正常组及生理盐水组明显下降,低浓度雷帕及高浓度雷帕均显著改善腹膜功能(P<0.05)；HE染色及α-SMA、TGF-β免疫组化显示,高糖组呈现腹膜纤维化状态,低浓度雷帕及高浓度雷帕均显著改善腹膜纤维化状态,且高浓度相较低浓度效果更明显。细胞层面：高糖处理后细胞呈现EMT改变,表现为：α-SMA的表达量相较正常组明显升高,E-cadherin的表达量明显下降,迁移率明显增加,且呈浓度相关性(均P<0.05)。雷帕明显改善EMT表现,且呈浓度相关性(均P<0.05)。结论：通过动物层面及细胞层面验证了雷帕霉素对高糖引起的腹膜纤维化有明显的防治作用,在有效浓度范围内,其防治效果与剂量呈一定的正相关。验证了EMT在腹膜纤维化过程中的作用。雷帕霉素抑制EMT的机制主要表现为：抑制腹膜间皮细胞迁移,减少TGF-β的分泌,抑制成纤维细胞的形成,抑制细胞外基质形成。
【作者】项世龙；
【导师】寿张飞；
【作者基本信息】浙江大学，内科学，2014，硕士
【关键词】腹膜透析；腹膜纤维化；高糖；雷帕霉素；上皮间质转化；

【参考文献】
[1]记者吴建明.签订战略合作框架协议[N].闽东日报,2012-10-24A01.
[2]何璨.基于物理混沌和轮廓波变换的数字水印算法研究[D].黑龙江大学,信号与信息处理,2013,硕士.
[3]黄小军.半刚性基层沥青路面抗裂连续及施工工艺研究[D].华中科技大学,道路与铁道工程,2013,硕士.
[4]李玲.昆山市土地合理集约利用分析[D].南京农业大学,公共管理,2011,硕士.
[5]王长全.网络经济下我国零售企业的创新与发展[J].商场现代化,2005,25:47-48.
[6]曹强.UHF宽带网络电台接收机射频前端的研究与实现[D].杭州电子科技大学,电磁场与微波技术,2013,硕士.
[7]邓超.聚众斗殴罪三大疑难问题研究[D].西南政法大学,刑法,2012,硕士.
[8]尚文松.基于Camshift的笔迹跟踪方法的研究[D].北方工业大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[9]路杰.酒店式公寓的物业管理现状及对策研究[D].青岛大学,旅游管理,2013,硕士.
[10]李亚婧.功能性钛酸酯催化己内酯常温活性开环聚合[D].华中科技大学,光学工程,2013,硕士.
[11]农浩.学案导学在高中思想政治课中的应用探究[D].广西师范大学,课程教学论（专业学位）,2013,硕士.
[12]张少杰.添加不同有机基质对黄瓜生长及根区环境的影响[D].河南科技大学,园艺（专业学位）,2014,硕士.
[13]奥锦霞.女性主义阅读理论的历史研究[D].延安大学,文艺学,2014,硕士.
[14]梁玉欣.C公司推行EVA考核体系的研究[D].电子科技大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[15]陈莹.初中课堂情感目标达成过程中存在的问题与对策研究[D].渤海大学,课程与教学论,2013,硕士.
[16]张学文.网络团购合同的法律问题研究[D].首都经济贸易大学,民商法,2013,硕士.
[17]徐康锋.网站信息环境对消费者感知质量的影响研究[D].浙江大学,企业管理,2014,硕士.
[18]宣旭阳.等离子体纳米天线SERS基底的制备及应用[D].吉林大学,物理化学,2013,硕士.
[19]于新芳.天然产物Neoalbaconol诱导肿瘤细胞程序性坏死的分子机制[D].中南大学,基础医学,2014,博士.
[20]姚鹏.6061铝合金热变形及时效行为研究[D].燕山大学,材料工程,2013,硕士.
[21]余志和,张庆淮,邸志欣,徐锦玺,荆中书.滩海地区采集方法研究[J].石油地球物理勘探,2001,04:471-479+516.
[22]薛嘉.云计算下教学互动平台的探究和设计[D].西南交通大学,教育技术学,2014,硕士.
[23]袁方.著作权合理使用制度研究[D].湘潭大学,经济法学,2003,硕士.
[24]MekalihAbrahamAsemelash.Parental Communication and Adolescence Attitude Towards Premarital Sexual Behavior:A Study in Eritrea[D].华中师范大学,AppliedPsychology,2014,硕士.
[25]盖俊东.基于图像特征指标的汽车主减速器总成质量检测技术研究[D].电子科技大学,精密仪器及机械,2012,硕士.
[26]卢娟.论舆论监督对警察权运行的影响[D].湖南师范大学,法律（专业学位）,2013,硕士.
[27]刘丹华.中国博士后制度的制度分析[D].浙江大学,2004.
[28]刘永耀.Excel数据导入Oracle数据库表方法的研究与对比[D].东华大学,软件工程（专业学位）,2014,硕士.
[29]赵悦.葛兰西实践哲学及当代反思[D].黑龙江大学,马克思主义哲学,2013,硕士.
[30]尤晓晶.不同电针头穴透刺对帕金森模型大鼠脑内黑质Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性影响的实验研究[D].黑龙江省中医药科学院,针灸推拿学,2013,硕士.
[31]郭吉如.商业插画在流行文化产业中的应用研究[D].河北科技大学,设计艺术学,2014,硕士.
[32]田宏桥.基于Flex的信息可视化框架研究与实现[D].北京邮电大学,2011.
[33]陈炳合.肠源性内毒素与肝脏TLR4在大鼠SAP肝损伤中变化的关系[D].山西医科大学,外科学（专业学位）,2013,硕士.
[34]张澍.哲学视角下的当代文化体制改革[D].福建师范大学,马克思主义哲学,2013,硕士.
[35]赵现飞.基于RTT的虚拟风洞流场可视化研究与应用[D].吉林大学,车身工程,2013,硕士.
[36]王健.乡村基督教本土化研究[D].西南大学,社会学,2014,硕士.
[37]李芝涵.老年公寓康复性景观设计研究[D].长安大学,建筑设计及其理论,2013,硕士.
[38]张璐.电视专题节目的故事化制作探究[D].辽宁大学,广播电视艺术学,2012,硕士.
[39]刘国红.交联型PBI类高温质子交换膜的制备与性能研究[D].山东理工大学,2014.
[40]张瑞霞,王勇.一种基于数据挖掘的入侵检测模型[J].计算机与现代化,2003,05:58-61.
[41]虞晓芬,金细簪.城市征地拆迁中谋利型抵制行为的思考[J].城市发展研究,2013,12:151-153.
[42]吴恒.漫画拟声拟态词的汉译极限[D].西南交通大学,日语语言文学,2014,硕士.
[43]曹茹.MoS_2的储锂机制及其改性研究[D].中国矿业大学,材料学,2014,硕士.
[44]铁军,朱旺喜,吴智明.数据挖掘技术在铝电解生产中的应用[J].有色金属,2003,01:56-59.
[45]张双龙.混合乳酸菌抗鸡球虫感染作用效果的检测[D].吉林农业大学,兽医,2012,硕士.
[46]王伟.AGS3在大鼠脑损伤过程中表达变化及作用的研究[D].苏州大学,神经外科学,2013,硕士.
[47]陈红叶.壳聚糖缓释膜共混改性的研究及其在洗涤用品中的应用[D].广东工业大学,应用化学,2014,硕士.
[48]蔡玲霞.β-二酮亚胺基芳氧稀土配合物对碳化二亚胺的活化研究[D].苏州大学,有机化学,2013,硕士.
[49]郁丽丽.论《战国策》叙事艺术[D].西北师范大学,中国古代文学,2013,硕士.
[50]陈宝琛.关于翻译硕士的百科知识在职场中应用的调研报告[D].广东外语外贸大学,翻译（专业学位）,2013,硕士.